کیت الایزا پیشتاز طب - Vitamin D

کیت OH VitaminD-25 حاضر، به روش رقابتی و به کمک آنتی بادی مونوکلونال طراحی گردیده است. در این روش چاهکها توسط آنتی بادی مونوکلونال که بر علیه مولکول OH VitaminD-25 می باشد پوشش داده می شوند( Coating). استانداردها و نمونه بیماران با آنتی بادی پوشش داده شده در ته چاهکها به همراه بافر استخراج جهت استخراج ویتامین D از پروتئین متصل شونده آن (VitaminD Binding Protein)، مجاور می شوند و پس از انکوباسیون،OH VitaminD -25 که متصل به بیوتین است به چاهکها اضافه می شود که این OH VitaminD-25 بیوتینه (Biotinylated 25-OH VitaminD) با OH VitaminD-25 نمونه ها در اتصال بهآنتی بادیهای کوت شده در چاهکها رقابت می کند، بنابراین هر چه مقدار OH VitaminD-25 در نمونه بیشتر باشد مقدار OH VitaminD-25 بیوتینه کمتری به آنتی بادی های کوت شده متصل می گردد و بالعکس، سپس استرپتاویدین متصل به آنزیم HRP به ویتامین D بیوتینه متصل می شود. پس از شستشو، محلول رنگزا که محتوی هیدروژن پراکسید( H2O2) و کروموژن است به داخل چاهکها ریخته شده و انکوبه می گردد که بعد از انکوباسیون رنگ آبی پدید آمده به صورت معکوس با غلظت OH VitaminD-25 موجود در نمونه ها متناسب است، برای جلوگیری از فعالیت بیش از اندازه و نامناسب آنزیم، محلول متوقف کننده افزوده می گردد که فعالیت آنزیم را مختل کرده و رنگ آبی را به زرد تبدیل می نماید که بهترین جذب نوری را در طول موج 450 نانومتر دارد .