کیت بیوشیمی زیست شیمی - توتال هموگلبین

کاربرد هموگلوبین تام  tHb

• • سنجش مستقیم: هموگلوبین تام tHb در خون، سرم، پلاسما، ادرار و غیره.
  • فارماکولوژی: اثرات داروها بر متابولیسم هموگلوبین.
  • کشف دارو: HTS برای داروهایی که سطح هموگلوبین را تعدیل می‌کنند.

کیت Total Hemoglobin 

حساس و دقیق: محدوده تشخیص خطی هموگلوبین ۰.۹ تا ۲۰۰ میلی گرم در دسی لیتر در روش پلیت ۹۶ چاهی.

ساده و با کارایی بالا: روش “مخلوط و خواندن” شامل افزودن یک معرف واحد است.

و خواندن چگالی نوری می‌تواند به‌آسانی به‌عنوان یک سنجش با توان بالا در صفحات ۹۶ چاهی خودکار شود برای هزاران نمونه در روز.

ایمنی: معرف‌ها غیرسمی هستند.

تطبیق‌پذیری: سنجش‌ها را می‌توان در صفحه یا کووت ۹۶ چاهی اجرا کرد.

SpHb چگونه کار می‌کند؟

SpHb که بخشی از تکنولوژی ویژه جهت اندازه‌گیری‌های غیرتهاجمی است، از طول‌موج‌های متعدد نور از طریق سنسور پالس CO اکسی‌متری استفاده می‌کند تا داده‌های تشکیل‌دهنده خون را از طریق جذب نور به دست آورد.

الگوریتم‌های پردازش سیگنال پیشرفته و فیلترهای تطبیقی منحصربه‌فرد با هم کار می‌کنند تا هموگلوبین  (SpHb) و اشباع اکسیژن (SpO2) ، علاوه بر متوگلوبین (SpMet) ، نرخ پالس (PR) ، شاخص پرفیوژن (Pi)  ، شاخص تنوع کامل (PVi)  و سایر پارامترها – همه در زمان واقعی را ارائه دهند.

روش SpHb با دید بیشتر ترکیبات خون، پزشکان را قادر می‌سازد تا تغییرات هموگلوبین را بین نمونه‌های خون تهاجمی نظارت کنند.

نظارت بر روند SpHb ممکن است بینش بیشتری بین نمونه‌های خون تهاجمی فراهم کند که:

روند SpHb ثابت است و در غیر این صورت پزشک ممکن است فکر کند هموگلوبین در حال کاهش است.

روند SpHb در حال افزایش است و در غیر این صورت پزشک ممکن است فکر کند هموگلوبین به‌اندازه کافی سریع افزایش نمی‌یابد.

روند SpHb در حال کاهش است و در غیر این صورت پزشک ممکن است فکر کند هموگلوبین ثابت است.

مزایای SpHb

دسترسی مداوم به سطوح هموگلوبین Hgb در زمان واقعی یک مزیت آشکار نسبت به روش‌های اندازه‌گیری سنتی است، زیرا پزشکان را قادر می‌سازد تغییرات در سطوح Hgb را به‌سرعت تشخیص داده و استراتژی‌های مدیریت بالینی را بر اساس آن تنظیم کنند.

اگرچه روش سیانمتاگلوبین توصیه شده توسط ICSH برای اندازه‌گیری هموگلوبین استفاده می‌شود، اما وجود سیانید پتاسیم در فرمولاسیون، خطر سمی برای مصرف‌کننده و از نقطه‌ای دفع بی‌خطر آن است. Prietest Hemoglobin – SLS فاقد سیانید پتاسیم است که یک معرف پایدار و غیرسمی است.

SLS غشای گلبول قرمز را مختل می‌کند و باعث تغییر هموگلوبین توسط SLS از طریق یک واکنش اکسیداسیون می‌شود که منجر به یک کمپلکس SLS-هموگلوبین پایدار می‌شود. این کمپلکس به‌صورت فتومتریک در ۵۴۰ یا ۵۴۶ نانومتر اندازه‌گیری می‌شود. تبدیل کل به کمپلکس SLS Hemoglobin بسیار سریع است و SLS متوگلوبین را به طور کامل تبدیل می‌کند و نتایج غلظت هموگلوبین را به دست می‌دهد که با روش سیانمتاگلوبین قابل مقایسه است.

مشخصات کیت توتال هموگلوبین زیست شیمی

اندازه‌گیری هموگلوبین در خون تام در کیت Total Hemoglobin  زیست شیمی با روش کلومتریک انجام می‌شود.

اهمیت کلینیکی کیت توتال هموگلوبین زیست شیمی:

هموگلوبین یک پروتئین پورفیرین با آهن (II) ظرفیتی است که انتقال گازهای 2O و 2CO بین شش‌ها و سایر بافت‌ها را انجام می‌دهد، لذا یک غلظت کافی از آن ضروری است. غلظت هموگلوبین در خونریزی‌ها، همولیز گلبول‌های قرمز و یا نقص در تولید خون در مغز استخوان کاهش پیدا می‌کند و برعکس در موارد اختلال در تبادل گازها در ریه و یا نارسایی‌های دیگر ریوی مقدار آن بالا می‌رود. اندازه‌گیری هموگلوبین خون در مراحل اولیه کم‌خونی به تشخیص آن کمک می‌کند.

اساس روش کیت Total Hemoglobin:

روش: HiCN Method/Colorimetric

روش کیت توتال هموگلوبین زیست شیمی به‌عنوان رفرنس ICSH شناخته می‌شود. در این روش خون لایز می‌شود و هموگلوبین آزاد می‌گردد ۲+Fe  آن توسط فری سیانور به مت هموگلوبین Fe3+ تبدیل می‌شود و در ادامه فرایند توسط KCN سیان مت هموگلوبین که ترکیب با دوامی است ایجاد می‌شود. جذب سیان مت هموگلوبین متناسب با مقدار هموگلوبین موجود در نمونه است طول‌موج در ۵۳۰-۵۵۰ نانومتر اندازه‌گیری می‌شود.

معرف‌ها:

Storage/ Avoid freezing	Amount	Presentation-500 mL
۲-۸ °C	۱* ۱۰ ml	Reagent 1 (50X)	R1a	Hb
۲-۸ °C	۱* ۱۰ ml	Reagent 2 (50X)	R1b	Hb
۲-۸ °C	۱* ۱۰ ml	Standard (20 g/dl)		Hb

آماده‌سازی معرف‌ها / پایداری/ امحا پسماند

محلول کار (درابکین): نسبت به نیاز ۱ میلی لیتر R1a و ۱ میلی لیتر R1b  را به بالن ژوژه ۵۰  میلی لیتر انتقال داده و با آب مقطر به حجم برسانید pH آن میبایست ۷.۲±۰.۲باشد (این محلول دور از نور در دمای ۱۵-۲۵ درجه سانتیگراد ۳ ماه پایدار است) / پسماند کیت را با آب رقیق نموده و در فاضلاب شهری تخلیه کنید (دستورالعمل مدیریت پسماندهای آزمایشگاهی ۲ مرجع سلامت)

هشدار ایمنی: محلول حاوی سیانور بوده و بسیار سمی است از برخورد با پوست بدن، چشم و دهان در حین کار جلوگیری شود و در صورت اتفاق محل را با آب فراوان شستشو دهید.

نکات قابل‌توجه:

محلول آماده درابکین شفاف و به رنگ زرد روشن است. جذب آن در طول‌موج ۵۴۶ نانومتر صفر خوانده می‌شود، در صورت مشاهده کدورت و یا بی‌رنگ شدن آن را دور بریزید.

 اطراف سرسمپلر یا پیپت‌های مورداستفاده را از خون بادقت پاک کنید و آن را داخل محلول درابکین چندین بار پیپتاژ بنمایید.

نمونه مورد آزمایش:

خون تام (از هر نوع ضدانعقاد جهت انجام آزمایش می‌توان استفاده کرد.) لازم به ذکر است که از ضد انعقادها به‌صورت خشک استفاده شود، در غیر این صورت ضریب رقت در محاسـبه منظور گردد.

پایداری نمونه ۶ روز در دمای ۲ تا ۸ درجه سانتیگراد میباشد .

پارامترها:

دما:۲۵ ۱۵ درجه سانتیگراد

طول موج: 546 نانومتر

کووت : 1 سانتی متر

حجم نمونه : 10 میکرولیتر

حجم معرف : 2.۵ میلی لیتر

خوانش: مقابل بالنک معرف

نوع واکنش: افزایشی.