کیت الایزا پیشتاز طب - Fasciola hepatica IgG

مشخصات کیت الایزا فاسیولا هپاتیکا 

نام کیت: Fasciola hepatica IgG

روش الایزا: یکی از معتبر ترین روش ها در تشخیص فاسیولازیس روش الایزا میباشد که در این روش می توان فرد بیمار را دو تا چهار هفته بعد از ابتلا به انگل شناسایی نمود، با استناد به رفرانسهای معتبر حساسیت روش الایزا بیش از %۹۵می باشد، در ضمن واکنش متقاطع در این تست فقط با شیستوزومیازیس مشاهده گردیده لذا تست از اختصاصیت بالایی برخوردار است. 

تعداد: ۹۶ تستی

برند: پیشتاز طب

اساس آزمایش: در ا ین کیت آنتی ژنهای فاسیولا هپاتیکا داخل چاهک ها متصل هستند. با ریختن نمونه در چاهک ها، اگر آلوده به انگل باشد، آنتی بادی های مربوطه به آنتی ژنهای کف چاهک متصل می گردند. افزودن آنتی بادی ضد IgGانسانی و مراحل بعدی الایزا رنگ آبی را به زرد تبدیل نموده و قابل شناسایی است.

طول موج: ۴۵۰ نانو متر دارد . 

محتویات کیت

نکات ایمنی و احتیاط

• جهت استفاده از کیت به سمپلرهای مختلف، آب مقطر و دستگاه الایزاریدر نیاز خواهید داشت.
• از محتویات این کیت برای سایر کیت ها استفاده ننمایید.
• از مخلوط کردن محتویات کیت ها با سریال های مختلف خودداری نمایید .
• محتویات کیت به جهت سلامت و آلودگی کنترل شده است، با این حال نکات ایمنی را هنگام کار با کیت لحاظ نمایید.

شرایط نگهداری :

• کیت را در یخچال بین دمای  ۲ تا  ۸ درجه سانتی گراد نگهداری نمایید .
• چاهک ها را در کیسه مخصوص پلیت همراه با نمگیر نگهداری نمایید .
• به تاریخ انقضای کیت ها توجه نمایید.
• محلول شستشوی آماده مصرف در شرایط نگهداری در یخچال به مدت یک هفته پایدار است.
• قبل از شروع مراحل آزمایش تمام مواد و نمونه ها را به درجه حرارت اتاق برسانید .
• به محض شروع آزمایش کلیه مراحل باید بدون توقف انجام پذیرند .
• از نوک سمپلر یک بار مصرف برای هر نمونه استفاده کنید .
• پس از افزودن محلول متوقف کننده جذب نوری چاهک ها حداکثر تا نیم ساعت قابل قرائت می باشد .
• برای کسب نتایج مطلوب باید شستشوی چاهک ها بصورت کامل صورت گرفته و آخرین قطرات پس از شستشو از چاهک ها تخلیه شود .
• از مهمترین فاکتورها در حصول نتیجه مطلوب زمان انکوباسیون مناسب می باشد ، بنابراین پیشنهاد می گردد قبل از شروع آزمایش تمام مواد و محلولهای مورد نیاز را
• آماده نموده و درب محلولهای مورد نیاز را باز کنید، این عمل با کاهش فاصله زمانی بین مراحل سمپلینگ باعث نتایج دقیقتر می شود .

مراحل انجام آزمایش :

1. تعداد چاهکهای پوشش داده شده (Coated Wells) مورد نظر را انتخاب کرده و باقی چاهکها را به همراه نمگیر درون کیسه مخصوص نگهداری پلیت قرار داده و درب آن را ببندید .
2. نمونه ها را با کمک محلول رقیق کننده نمونه به نسبت  ۱به  ۱۰۱رقیق کنید. (کنترل ها آماده مصرف بوده نیازی به رقیق سازی ندارند).
3. ۱۰۰ میکرولیتر از کنترلها و نمونه های رقیق شده را طبق دستور زیر در چاهک ها بریزید:
   • چاهک اول را به عنوان بلانک انتخاب نموده و در آن چیزی نریزید .
   • برای کنترل منفی دو چاهک و برای کنترل مثبت یک چاهک را در نظر بگیرید .
   • بقیه چاهک ها را برای نمونه ها استفاده کنید .
4. پس از پوشاندن چاهک ها توسط برچسب مخصوص پلیت، چاهک ها را برای مدت  ۳۰ دقیقه در دمای اتاق انکوبه کنید .
5. شستشو: محتویات چاهکها را خالی کرده و چاهکها را  ۵بار با محلول شستشوی آماده مصرف بشویید. (در هر دفعه شستشو حدود  ۳۰۰میکرولیتر محلول شستشو در هر چاهک ریخته و سپس چاهک ها را با وارونه کردن و تکاندن خالی نمایید و در انتهای عملیات شستشو چاهک ها را در حالت وارونه و با ضربات ملایم بر روی یک پارچه یا کاغذ نمگیر بکوبید تا قطرات اضافی خارج شوند)
6. ۱۰۰ میکرولیتر از محلول آنزیم کنژوگه را به داخل کلیه چاهکها به استثنای چاهک بلانک بریزید .
7. پس از پوشاندن چاهکها توسط برچسب مخصوص پلیت چاهکها را به مدت  ۳۰ دقیقه در درجه حرارت اتاق انکوبه نمایید .
8. تکرار مراحل شستشو.
9. ۱۰۰ میکرولیتر محلول رنگزا  Chromogen-Substrateبه هر چاهک اضافه نمایید .
10. چاهک ها را به مدت  ۱۵دقیقه در درجه حرارت اتاق و در تاریکی انکوبه نمایید .