کیت انستیتو پاستور - بافر+2ME

تعریف اصلی آنتی ژن 2ME

از این آنتی ژن برای شناسایی آنتی بادی ضد بروسلا در آزمایش رایت 2ME استفاده می گردد. این تست را به جهت تشخیص برسلولز حاد و مزمن از همدیگر پس از انجام دادن آزمایش رایت در شرایطی که در مرحله اولیه در بیمار کشت خون منفی شده و تیتر آگلوتینین هم در سرم خون  بیمار کم بوده انجام می دهند. 

در این شرایط علائم بالینی بیمار با علائم تب مالت بسیار نزدیک بوده و مطابقت دارد. بطور کلی انجام این آزمایش جهت تعیین مزمن بودن بیماری بروسلولز است.

در این روش 2ME موجود در تامپون مربوط باعث از بین رفتن IgM (19s) می گردد در صورتی که IgG به طور فعال باقی می ماند.

محتویات کیت آنتی ژن 2ME:

۶  ویال در هر بسته

یک ویال آنتی ژن 2me

یک ویال بافر 2me

 

پایداری محصول:

به علت کم بودن تاریخ مصرف کیت آنتی ژن 2ME، بهتر است در کوتاهترین زمان مصرف گردد.

 

روش انجام آزمایش با کیت آنتی ژن 2ME:

• معرف ها و کنترل های موجود را به دمای محیط برسانید.
• در زمان مصرف آنی ژن آن را به خوبی تکان داده تا بصورت یکدست در بیاید.
• مطابق جدول زیر ، از ۸ لوله تمیز سرولوژی  برای انجام آزمایش استفاده نموده و درون جا لوله ا ی مخصوص قرار دهید. سپس درون لوله اول 1ml  بافر 2ME  بریزید.  در مرحله بعد ۱۰۰ میکرولیتر از آن را برداشته و به جای آن، ۱۰۰ میکرولیتر از سرم را بریزید .
• به مدت یک ساعت در دمای اتاق قرار دهید تا انکوبه گردد.
• به بقیه لوله های انتخابی  مقدار  ۵/0ml  بافر 2ME  اضافه نمایید.
• سپس حجم  ۵/0ml  از لوله اول برداشته و به لوله دوم اضافه کنید. در ادامه  پس از مخلوط کردن محتویات لوله دوم به میزان  ۵/0ml  از آن را به لوله سوم بیافزایید و برای مابقی لوله ها نیز همین مراحل را تکرار کنیدو ۵/۰ ml پایانی را دور بریزید.  
• سپس به همه لوله ها مقدار ۵/0ml  آنتی ژن 2ME را  اضافه کنید.
• بر این اساس نسبت تیتر ها به ترتیب ۱:۲۰-۱:۴۰ و … می باشند.
• برای ساخت محلول شاهد منفی ۵/0ml  آنتی ژن رقیق شده یا آماده مصرف را با ۵/0ml  بافر 2ME  در یک لوله دیگر مخلوط نمایید.
• برای ساخت محلول شاهد منفی ۵/0ml  نمونه سرم مثبت رقیق شده را ا ۵/0ml  بافر 2ME  در یک لوله دیگر مخلوط نمایید.
• لوله ها را به مدت ۲۴ ساعت در انکوباتور در دمای ۳۷ درجه سانتی گراد قرار داده و بعد از آن زیر نور از نظر آگلوتینه بررسی کنید.

۸	۷	۶	۵	۴	۳	۲	۱	لوله
ml 5/0	ml 5/0	ml 5/0	ml 5/0	ml 5/0	ml 5/0	ml 5/0	ml 9/0	تامپون 2ME
–	–	–	–	–	–	–	ml 1/0	سرم بیمار
								یک ساعت در دمای اتاق
ml 5/0	ml 5/0	ml 5/0	ml 5/0	ml 5/0	ml 5/0	ml 5/0	ml 5/0
ml 5/0	ml 5/0	ml 5/0	ml 5/0	ml 5/0	ml 5/0	ml 5/0	ml 5/0	آنتی ژن 2ME
۱/۲۵۶۰	۱/۱۲۸۰	۱/۳۲۰	۱/۶۴۰	۱/۱۶۰	۱/۸۰	۱/۴۰	۱/۲۰	رقت ها

 

تفسیر نتایج :

آزمایش 2ME  برای مشخص کردن نوع ایمونوگلوبین های موجود در سرمی که سبب آگلوتیناسیون می شود انجام می گیرد .

این آزمایش پس از مثبت شدن آزمایش رایت انجام می شود تا کلاس آنتی بادی را تشخیص دهد.

مهمترین کاربرد این آزمایش تشخیص جدا بروسلولز حاد و مزمن از همدیگر پس از انجام دادن آزمایش رایت در شرایطی که در مرحله اولیه در بیمار کشت خون منفی شده و تیتر آگلوتینین هم در سرم خون  بیمار کم بوده انجام میدهند و این در حالی است که علائم بالینی بیمار با علائم تب مالت بسیار نزدیک بوده و مطابقت دارد. بطور کلی انجام این آزمایش جهت تعیین مزمن بودن بیماری بروسلولز است.

همچنین با انجام این آزمایش می توان تاثیر و نوع آنتی بیوتیک مناسب را در درمان بیمار مورد بررسی قرار داد. مرکاپتواتانول ماده  شیمیایی احیا کننده ایست که در غلظت مشخص شده ای پیوند دی سولفیدی در   IgM را شکسته و خاصیت آگلوتیناسیون  IgM را از بین می برد.  

اگر سرم بیمار بعد از مخلوط شدن با 2ME آگلوتیناسیون ندهد، به این معنی است که آگلوتیناسیون موجود IgM بوده است اما اگر میزان آگلوتینین1gG  باشد ، تیتر بدست آمده همان تیتر 1gG  می باشد.

 

توجه:

از آنجا که تاریخ مصرف تامپون 2ME که همراه با آنتی ژن مربوطه عرضه می گردد، کوتاه است، بنابراین پیشنهاد می گردد این تامپون هر چه سریعتر مورد استفاده قرار گیرد.